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NEST細(xì)胞培養(yǎng)如何選擇合適的呢?

點(diǎn)擊次數(shù):1681 更新時(shí)間:2021-06-22
  NEST細(xì)胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無(wú)菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等),使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。
 
  不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù),還是其中之一的生物克隆技術(shù)來(lái)說(shuō),本身就是細(xì)胞的大規(guī)??寺?。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞,而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。
 
  市場(chǎng)上的NEST細(xì)胞培養(yǎng)可不少,如何選擇合適的呢?我們需要重點(diǎn)考慮孔的數(shù)量、孔的形狀、微孔板顏色以及表面處理。
 
  1.孔的數(shù)量
 
  大多數(shù)用戶在組織培養(yǎng)瓶上開始組織培養(yǎng)。不過(guò),許多應(yīng)用也需要多孔板。理想的數(shù)量嘛,取決于你所需的通量水平,以及是否有機(jī)器人的協(xié)助。*手動(dòng)地向96孔板中添加試劑,這并非不可行,但有電動(dòng)移液器或機(jī)器人的幫助當(dāng)然更好。擴(kuò)展到384孔板,就更加需要機(jī)器人,而1536孔板更是絕對(duì)需要。當(dāng)然,高密度多孔板的挑戰(zhàn)還在于分析小型化。
 
  2.孔的形狀
 
  孔的底部可以選擇平的、圓的,或錐形的,這取決于細(xì)胞類型和下游應(yīng)用。特別是需要對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行成像或分光光度測(cè)定,通常平底(F-bottom)。對(duì)于不存在接觸抑制的細(xì)胞,弧形底(C-bottom)也不錯(cuò)。圓底(U-bottom)適合懸浮培養(yǎng),因?yàn)閳A的表面讓細(xì)胞難以附著和生長(zhǎng)。而錐形底很少用于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),但在細(xì)胞沉淀時(shí)可能有用。
 
  3.微孔板的顏色
 
  多孔板的顏色也與應(yīng)用息息相關(guān)。如果用相差顯微鏡或肉眼觀察細(xì)胞,可選擇透明的多孔板。不過(guò),對(duì)于可見光光譜以外的應(yīng)用(如冷光或熒光),有顏色的多孔板(如白色或黑色)則是必需的。在使用從頂部讀數(shù)的儀器時(shí),底部應(yīng)該是不透明的,而使用顯微鏡或底部讀數(shù)的儀器時(shí),應(yīng)選擇底部透明的多孔板。冷光樣品通常選擇白色表面,以便最大限度提高信號(hào)的反射率,而大于300 nm的熒光應(yīng)用通常使用黑色表面,以吸收激發(fā)信號(hào)。有顏色的表面還可以防止相鄰孔之間的信號(hào)串?dāng)_。
 
  4.表面處理
 
  選擇哪種細(xì)胞表面處理,這要取決于你培養(yǎng)的是懸浮細(xì)胞還是貼壁細(xì)胞。對(duì)于懸浮或球體細(xì)胞培養(yǎng),它經(jīng)過(guò)專門的疏水凝膠處理,可抑制細(xì)胞或蛋白附著。對(duì)于輕松附著的貼壁細(xì)胞(如HeLa),標(biāo)準(zhǔn)的組織培養(yǎng)表面就足夠了。對(duì)于那些貼壁有困難的細(xì)胞(如原代細(xì)胞),或涉及到嚴(yán)格洗滌的應(yīng)用,建議使用BRAND的cellGrade微孔板。這種*的表面與多聚賴氨酸處理的表面相似,但它不是涂層,而是塑料性質(zhì)的物理變化,因此不需要冷藏。對(duì)于那些敏感細(xì)胞或血清量減少的細(xì)胞,建議使用cellGrade plus表面。
 
  當(dāng)然不能忽視培養(yǎng)容器的質(zhì)量。這不僅僅指NEST細(xì)胞培養(yǎng),還包括與細(xì)胞接觸的一切,比如吸頭,以避免細(xì)胞污染或死亡。
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